岛津液相色谱工作站外标法使用解析

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岛津液相色谱工作站外标法使用解析

外标法又称工作曲线法，首先配制含待测组分浓度不同的系列标准工作溶液,如果待测组分不止一个,我们也把该标准溶液称为混合标准溶液，然后进样得浓度不同的系列标准工作溶液的色谱图。通常利用浓度不同的系列标准工作溶液的色谱数据建立工作曲线和线性方程,然后根据试样的色谱数据既可以利用工作曲线查得试样的浓度数据,也可利用线性方程计算试样中各组分的浓度。在相同色谱条件下，可以用已建立的工作曲线或线性方程进行批量样品分析。 一、进样

首先进浓度不同的系列标准工作溶液，然后进试样，得标样色谱图和试样色谱图并保存。如果是单次分析（手动进样模式),在设置单次分析条件时，应将样品瓶架设置为“－1”,如图所示,然后按电脑提示进样,待采样结束后停在分析。

启动或停止单次分析，既可以用助手栏“主项目”下的功能按钮,也可用数据采集窗口中的功能按钮，如图所示。

通常使用数据采集窗口的功能按钮启动和停止单次分析更为高效。无论是启动或停止单次分析,系统均有“请稍后……”的等待提示,务必等待足够时间,方可进行下一步操作。 二、色谱图解析

得到色谱图后，套取组分的保留时间,确定组分的名称,输入标样中各组分的浓度是最基本的工作。有时还要根据色谱图的具体情况对色谱图进行手动处理,色谱图处理通常放在进样完成后,停机或在流动相置换期间进行。点击“ＬａbSolutioｎs Esｓeｎｔia主项目”窗口下的“处理工具”图标，再双击右边窗口中的“再解析”图标，弹出“再解析”(即数据处理）窗口。在数据管理器选择文件所在的文件夹，切换到数据标签，打开所需的数据文件,这里我们选择打开“化妆品抗菌剂_Ｓｔd11”数据文件,过程如图所示。

1.编辑色谱图

数据窗口由色谱图视图、结果视图、方法视图组成。方法视图右上角有“视图”和“编辑”两个图标，只有切换到“编辑”模式,色谱图数据才是可以编辑的，在“视图”模式下方法视图里九个标签下的编辑框是灰色的,只能浏览。要手动编辑色谱图，点击快捷图标栏的“手动积分栏”图标是不可少的，上述三个经常使用的图标如图所示。

要编辑色谱图,单击“手动积分栏”图标，弹出手动积分栏,如图所示。

在编辑色谱图时,经常想去掉不用的色谱峰，这时可用“去除峰(不校正）”功能按钮,拖选不要的色谱峰使色谱图简洁,更有针对性。

方法视图里的九个标签,最常用的是“积分”、“定量处理”和“化合物”三个标签。“积分”标签如下:

一般使用默认值，但可通过修改“最小面积/高度”来控制色谱图中峰显示的多少。

“定量处理”标签是非常重要的标签。这里我们要用的定量方法是外标法,所以定量方法选择外标法，配制的羟苯混酯标准系列工作溶液有３个,所以校准曲线最大级别数选为3,如果只有一个标准溶液就设置为1,根据实际情况修改浓度单位和格式，岛津工作站的浓度单位设置更为灵活,其他工作站一般是通过下拉列表框选择合适的单位,浓度值格式更符合实际工作的情况，在出报告时,我们更关心数字的有效位数。如果只有一个标样，建议选择工作曲线过原点，即“零截距”。

“化合物”标签更是非常重要的标签。在这里我们要套取色谱峰的保留时间，这是定性、定量的基础，获取了保留时间后,输入相应的化合物名称和其在不同标样里的浓度。

完成上述必须的编辑修改后,保存修改后的数据文件。按相同的方法修改、保存数据文件“化妆品抗菌剂_Std12”至“化妆品抗菌剂_Std33”。需要说明的是，每个标准溶液进了3次样, 所以“化妆品抗菌剂_Sｔd11”至“化妆品抗菌剂_Std13”为第一个标样的数据文件，“化妆品抗菌剂_Stｄ２1”至“化妆品抗菌剂_Std23”为第二个标样的数据文件，“化妆品抗菌剂_Ｓtd31”至“化妆品抗菌剂＿Std33”为第三个标样的数据文件。 至此,所有标样的数据文件编辑、修改、保存完成。 ２.创建校准曲线

岛津LａbSolutｉｏs有一种快速建立校准曲线的方法。打开保存的数据文件“化妆品抗

菌剂＿ｓｔd11”,切换到视图模式,点击“主项目”下的“应用到方法”图标，在弹出的“方法另存为”对话框中输入要保存的校准曲线的名称,这里我们输入“化妆品抗菌剂校准曲线”保存,接着在弹出来的窗口中选中“当前设置”，勾选“数据处理参数”和“系统适用性设置”，按“确定”按钮保存。切换到方法标签，可以看到“化妆品抗菌剂校准曲线”方法文件已经存在了。岛津把定量分析数据的校准曲线文件称为方法文件,后缀仍为“.lcｍ”,因此岛津方法文件中可以有仪器参数方法文件和数据分析方法文件,建议把仪器参数文件和分析数据的方法文件分别建立、保存。

在方法标签的文件名框中双击“化妆品抗菌剂校准曲线”方法文件，在右面窗口中显示校准曲线编辑窗口,校准曲线窗口由校准曲线视图、方法视图、色谱视图和数据文件编辑窗口组成。

数据文件的添加与删除在数据文件窗口进行。在窗口右上角的数据文件窗口右击数据文件下的“级别１”,在弹出来的菜单列表中单击“添加…”，在弹出来的窗口中选中要添加得数据文件,比如“化妆品抗菌剂＿Ｓtd11”至“化妆品抗菌剂_Std13”，点击打开,如图所示。

你会发现,在级别1下面就出现了刚才选中的三个数据文件。同理,右击数据文件下的“级别2”，在弹出来的菜单列表中单击“添加…”,选中要添加得数据文件“化妆品抗菌剂_Stｄ21”至“化妆品抗菌剂_Std23”,点击打开；再右击数据文件下的“级别３”，在弹出来的菜单列表中单击“添加…”,选中要添加得数据文件“化妆品抗菌剂＿Std31”至“化妆品抗菌

剂_Std３3”,点击打开，可以看到，每个级别下面均有了三个文件了，添加完数据文件后的“校准曲线视图”窗口会出现每种物质的校准曲线及相关信息,如图所示。

点击化合物下的方向按钮，可以切换、查看每种化合物的校准曲线和线性方程、线性相关系数R等信息,右侧的色谱图视图中会发生相应的变化,显示所选中物质的色谱峰。

当然,有了标准系列工作溶液的色谱数据文件后,要创建校准曲线，还可以直接在助手栏“主项目”中点击“校准曲线”图标，然后点击菜单栏的“文件”/“新建方法文件”,在弹出来的窗口中选择数据文件比如“化妆品抗菌剂_Sｔd11”打开，进入校准曲线窗口,在窗口的数据文件小窗口里添加数据文件,在下面的方法视图窗口再对数据文件进行编辑、保存,创建校准曲线。 3.分析试样

校准曲线建好后,便可分析试样了。校准曲线的最大好处就是可以进行批量样品分析。岛津工作站分析试样非常简单,首先打开要分析的试样数据文件如“化妆品抗菌剂_Smp1.lｃd”,然后点击菜单栏“文件”/“加载方法参数…”,在弹出的对话框窗口中选择校准曲线文件“化妆品抗菌剂校准曲线.lcm”,打开,在接着弹出的窗口中，保持默认选项，按确定按

钮,你就会发现数据窗口右上角[方法文件名]下面的更新已为“化妆品抗菌剂校准曲线．lcm”了。同时窗口左下角结果视图－化合物结果表已出现分析结果了,分析结果如图所示。